Riassunto analitico
L’ormone luteinizzante (LH) e la gonadotropina corionica umana (hCG) svolgono un ruolo fondamentale nello sviluppo e nella riproduzione. Nella donna in età fertile, LH regola lo sviluppo del follicolo ovarico, la maturazione dell’ovocita, l’ovulazione e la produzione di ormoni steroidei. hCG è l’ormone della gravidanza ed è un potente induttore della sintesi di progesterone. Nonostante LH e hCG agiscano sullo stesso recettore (LHCGR), presente nelle gonadi, inducono quantitativamente e qualitativamente un diverso cell signaling intracellulare. LH attiva preferenzialmente segnali anti-apoptotici e proliferativi, mentre hCG prevalentemente steroidogenici. LHCGR è quindi in grado di discriminare il legame delle due molecole. Esistono alcune isoforme recettoriali la cui funzione è sconosciuta. Tali isoforme sono varianti trascrizionali derivanti dalla presenza di un esone criptico, chiamato esone “6 A”, le cui mutazioni sono associate a ipoplasia delle cellule di Leydig nell’uomo. Tuttavia, la loro funzione e meccanismo d’azione è sconosciuto. E’ plausibile pensare che possano servire per aumentare il livello di discriminazione dei due ligandi naturali da parte di LHCGR. Con questo studio ho confrontato l’attivazione dei segnali steroidogenici, mediati da LH e hCG, in cellule primarie della granulosa umana, naturalmente esprimenti LHCGR, e trattate con siRNA selettivi per le varie isoforme di LHCGR 6 A. Tali cellule sono state stimolate con dosi equipotenti (EC50) di LH e hCG. Quindi, ho valutato la produzione di cAMP mediante ELISA, la fosforilazione di CREB mediante Western blotting, la trascrizione dei geni CYP19A1 e STARD1 con real time PCR e la produzione di progesterone con saggio immunometrico. I risultati rivelano che l’inibizione selettiva di alcune delle isoforme recettoriali è correlata alla differenziazione del cell signaling, dell’espressione genica e della sintesi di progesterone LH- e hCG-specifica. In generale, i segnali LH-dipendenti risentono maggiormente dell’inibizione dovuta a deplezione di mRNA specifici. Questo studio fa luce su alcuni aspetti sconosciuti del cell signaling LH- e hCG-specifico, mediato da isoforme di LHCGR.
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