Riassunto analitico
Il controllo delle sostanze proibite nei fantini e nei guidatori ha la scopo di proteggere l’integrità dell’evento sportivo e il benessere del cavallo; al fine di garantire ciò è stato sviluppato un metodo interno di screening e di conferma per l’identificazione qualitativa di sostanze dopanti appartenenti alle seguenti classi: stimolanti, narcotici, β2-agonisti, β-bloccanti, dimagranti e anoressizzanti. A seguito del pretrattamento del campione con idrolisi enzimatica, il metodo prevede un’estrazione in fase solida (SPE) ed un’analisi in cromatografia liquida accoppiata alla spettrometria di massa (HPLC-MS) con rilevatore a triplo quadrupolo, sorgente ESI in polarità positiva (MRM). I risultati ottenuti sono stati validati in termini di Taratura, Specificità, Limite di rilevabilità (LOD), Precisione e Recupero Percentuale secondo i criteri definiti in fase di progettazione. Infine, a seguito dello sviluppo e della validazione dei parametri ottenuti sono stati analizzati campioni reali positivi alle sostanze considerate per verificare la conformità/applicabilità del metodo stesso.
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Abstract
The banned substances control in driver and horseman designs to protect the sporting events integrity and the horse welfare; in order to ensure it, an internal screening and confirmatory method has been developed to identify qualitatively doping substances belonging to the following chemical classes: stimolants, narcotics, β2-agonists, β-blockers and anorexogenics.
After the sample pre-treatment by enzymatic hydrolysis, this method provides a Solid Phase Extraction and High Performance Liquid Chromatography analysis coupled to a triple quadrupole Mass Spectrometer (HPLC-MS), positive polarity Esi source (MRM).
The obtained results has been validated in relation with Calibration, Specifity, Limit of Detection (LOD), Precision and Percentage Recovery according to the criteria specified during the design.
Finally, after the achieved parameters development and validation, positive control real samples has been analysed to verify the conformity/applicability of this kind of method.
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