• autofluorescence
• BCC
• histology
• SCC
• spectroscopy

Introduzione: L'autofluorescenza (AF) è definita come un’emissione di luce da parte di alcuni tessuti, associata alla concentrazione e distribuzione di fluorofori specifici, quindi molecole in grado di assorbire e riemettere luce di lunghezze d'onda specifiche. Recentemente sono emerse prove a supporto dell'utilità dell’AF per la diagnosi dei tumori del distretto testa-collo, sia a livello mucoso che cutaneo.
Obiettivo: Lo scopo di questo studio è indagare la correlazione tra l'intensità dell'autofluorescenza cutanea (AF) e le caratteristiche istopatologiche delle lesioni maligne e potenzialmente maligne della pelle, incluso il gruppo di NMSC.
Materiali e metodi: È stata sviluppata una configurazione spettrofotometrica sperimentale per valutare l'intensità della fluorescenza in modo quantitativo e obiettivo. Sono stati analizzati 115 punti sulle 98 lesioni incluse con lo spettrofotometro e per ognuna di queste è stato misurato un punto di controllo su pelle clinicamente sana. Tutti gli spettri sono stati emessi in forma normalizzata a 500 nm e raggruppati secondo la diagnosi. L'intensità della fluorescenza è stata confrontata con diverse variabili istopatologiche (diagnosi, ipercheratosi, ispessimento epiteliale, fibrosi, elastosi, neovascolarizzazione e atipia cellulare) al fine di identificare quali fossero le più rilevanti nell'influenzare il pattern di fluorescenza della lesione e stabilire le basi istopatologiche della fluorescenza della pelle.
Risultati: Dei 115 punti analizzati la diagnosi è stata: 51,3% dei casi BCC, 46,1% SCC e 2,6% una diversa diagnosi benigna. Delle variabili istologiche analizzate è stato evidenziato un aumento del rapporto di intensità relativamente a un aumento del grado di ipercheratosi. In particolare, l'analisi statistica ha evidenziato una variazione significativa dell'intensità di fluorescenza tra il grado 0 (ipercheratosi assente) e il grado 3 (ipercheratosi massima). Solo la fibrosi, e non l'elastosi, è risultata statisticamente significativa nell'influenzare l'intensità della fluorescenza. Per quanto riguarda l'ispessimento epiteliale, il confronto tra ispessimento assente e grado 4 è stato statisticamente significativo. Infine, la presenza di neovascolarizzazione è stata associata ad una maggiore ipo-fluorescenza.
Discussione: Le variabili statisticamente significative nella variazione dell’ intensity ratio sono: la presenza / assenza di fibrosi, la presenza / assenza di elastosi, la presenza di neovascolarizzazione di qualsiasi grado e la presenza di ipercheratosi di massimo grado.
Nell’analisi statistica sono state incluse anche variabili sistemiche e comportamentali ma nessuna di queste (fumo, diabete, ipertensione, malattie autoimmuni e terapia anticoagulante) è stata significativa nell'influenzare il grado di fluorescenza della lesione. È emersa una correlazione statisticamente significativa tra ipertensione ed elastosi: l'85% dei pazienti presentava sia ipertensione che elastosi. Questa è probabilmente una correlazione casuale dovuta al fatto che in un campione con un'età media di 79 anni, l'ipertensione è molto comune e l'elastosi è presente in quasi tutti i pazienti a seguito della fotoesposizione. Un'altra considerazione riguarda il fototipo della pelle: il campione è risultato estremamente omogeneo con un fototipo II nella quasi totalità dei casi (95%) e solo nel 5% dei pazienti con fototipo III. Questo perché l'incidenza di NMSC è più diffusa nei fototipi I e II.
Conclusione: I risultati del presente studio suggeriscono che l’analisi degli spettri di fluorescenza sembra essere uno strumento estremamente efficace per l’identificazione dei NMSC in modo non invasivo, rapido e in tempo reale.
I risultati di questo studio ne fanno una tecnica potenzialmente adatta sia alla diagnosi precoce che all'uso intraoperatorio per la precisa demarcazione dei margini chirurgici.

Introduction: Autofluorescence (AF) is defined as an emission of light by some tissues, associated with the concentration and distribution of specific fluorophores, molecules that can absorb and re-emit light of specific wavelengths. Evidences have recently emerged, supporting the usefulness of AF for head and neck cancer diagnosis, both at mucosal and cutaneous level. Aim: The primary objective of this study is to analyze the variation of fluorescence intensity of malignant and potentially malignant lesions of the skin included the group of NMSC in relation to a series of histological variables specifically studied for each point of the lesion analyzed with the spectrophotometer. Materials and Methods: An experimental spectrophotometric setup was developed to evaluate the intensity of fluorescence in a quantitative and objective way. 115 points of the 98 lesions included in the study were analysed with the spectrophotometer setup and for each of these a control point was measured on clinically healthy skin. All spectra were emitted in normalized form at 500 nm and grouped according to the diagnosis. The fluorescence intensity was compared with different histopathological variables in order to identify which were most relevant in influencing the fluorescence pattern of the lesion and to establish the histopathological basis of skin fluorescence. Results: The diagnosis of the 115 spectrum points analyzed was in 51.3% of cases BCC, in 46.1% SCC and in 2.6% a different benign diagnosis. The hyperkeratosis is one of the histological variables analyzed and an increase in the intensity ratio with an increasing in the degree of hyperkeratosis was highlighted. In particular, the statistical analysis showed a significant variation in the fluorescence intensity between the grade 0 (absent hyperkeratosis) and the grade 3 (maximum hyperkeratosis).Only fibrosis, and not elastosis, resulted statistically significant in influencing the intensity of fluorescence. With regard to epithelial thickening, the comparison between absent and grade 4 thickening was statistically significant. The last histopathological variable is the presence of neovascularization that was associated with a greater hypo-fluorescence compared to the absence. Discussion: The variables significant in varying the intensity ratio of the lesion resulted: the presence/absence of fibrosis and elastosis, the presence of neovascularization of any degree compared to absence and the presence of hyperkeratosis of maximum degree compared to absence. Systemic and behavioral variables were also included in the regression, but none of these (smoking, diabetes, hypertension, autoimmune diseases and anticoagulant therapy) was significant in influencing the degree of fluorescence of the lesion. A statistically significant correlation emerged between hypertension and elastosis: 85% of patients had both hypertension and elastosis. This is probably a random correlation due to the fact that in a sample with an average age of 79, hypertension is very common, and elastosis is also present in almost all patients as a result of photo-exposure. Another consideration regards the phototype of the skin: the sample resulted extremely homogeneous with a phototype II in almost all cases (95%) and only 5% of patients with phototype III. This is because the incidence of NMSC is more widespread in light phototypes (I-II). Conclusion: The results of this study suggest that the analysis of fluorescence spectra appears to be an extremely effective tool for the identification of NMSCs in a non-invasive, rapid and real-time manner. This demonstration could lead to the introduction into clinical practice of a totally non-invasive, real-time and simple to use technique both for first-level diagnosis, and for the demarcation of surgical margins, and for the follow-up of treated patients.