Riassunto analitico
Il secreto di Helix aspersa (HA), nota come chiocciola, è ampiamente utilizzato in ambito cosmetico e dermatologico per le sue proprietà chimiche, fisiche e biologiche. A fronte di alcune preliminari evidenze scientifiche che suggeriscono un potenziale rigenerativo della cute, lo studio - oggetto della tesi – ha analizzato gli effetti del secreto di HA sulla cute umana utilizzando modelli biologici bi- e tridimensionali. La vitalità cellulare rappresenta il primo elemento esaminato con saggio di citotossicità mediante MTT previsto nelle normative ISO10993-5:2009 somministrando alla coltura cellulare 4 differenti concentrazioni di secreto. Successivamente il test è stato eseguito nelle principali popolazioni cellulari residenti nella pelle: fibroblasti, cheratinociti, cellule endoteliali e cellule staminali mesenchimali isolate da tessuto adiposo. La valutazione citofluorimetrica in seguito a marcatura con Bromodeossiruridina e Annessina V è stata altresì introdotta a conferma che il secreto non impatta sull’apoptosi e sul ciclo cellulare. Al fine di valutare il ruolo funzionale del secreto nella cute abbiamo effettuato il saggio Scratch Test, noto saggio in 2D per valutare eventuali effetti sul potenziale migratorio delle cellule e un test in 3D utilizzando colture d’organo di cute umana. Quest’ultime sono state danneggiate mediante esposizione a SDS e successivamente trattate con il secreto per valutare la capacità di rigenerativa.
I risultati ottenuti mediante il saggio MTT e le indagini citofluorimetriche mostrano valori di vitalità elevati, in particolare nei fibroblasti e nei cheratinociti, è stata identificata una dose ottimale, che riporta valori di vitalità superiore, e pertanto selezionata per i successivi studi funzionali. L’aggiunta del secreto alle colture cellulari, inoltre, mostra elevata attività migratoria su diversi tipi cellulari e grande potenziale rigenerativo nei confronti di un tessuto cutaneo danneggiato. Nel nostro studio, l’estratto di HA si presenta come una sostanza innovativa che grazie alla sua azione rigenerativa, potrebbe essere impiegata anche in ambito clinico come, ad esempio, per la cura di ustioni e ferite.
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