Riassunto analitico
Questa tesi si inserisce nel contesto di ottimizzare le metodologie di coltivazione in vitro da applicare alla conservazione ex situ di orchidee spontanee. Il TIS è un nuovo sistema per la coltivazione in vitro delle piante. A differenza del metodo su substrato gelificato, tradizionalmente usato nelle colture in vitro, questo è dotato di un sistema di immersione temporanea del materiale biologico nel substrato liquido e di un sistema di ventilazione per regolare il ricambio d’aria. In questo lavoro è stato applicato il sistema TIS alla crescita di protocormi di orchidee mediterranee spontanee della specie Himantoglossum robertianum allo scopo di verificare l’efficacia di questo metodo rispetto al sistema tradizionale su substrato gelificato. I semi sono stati sottoposti a test di vitalità con test TTC, sono stati fatti germinare su terreno solido BM2 e monitorati fino al raggiungimento dello stadio di protocormo. I protocormi sono stati lasciati crescere per un mese circa nelle due condizioni sopra descritte. Il parametro impiegato per la valutazione della crescita è stato l’indice l’RGR (Relative Growth Rate). I risultati non hanno mostrato differenze significative di crescita fra i due sistemi di coltura. È inoltre stata allestita una prova per valutare la crescita di plantule di H. robertianum alle stesse condizioni testate in precedenza per i protocormi. I risultati hanno mostrato che il sistema TIS è più efficace nel promuovere la crescita delle plantule. I protocormi al termine della prima prova sono stati analizzati con microscopio elettronico a scansione (SEM) e con microscopio ottico per escludere la presenza di alterazioni micromorfologiche e danni cellulari riconducibili alle due condizioni di crescita in vitro.
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