• AML blasts
• cell cycle
• H3K27me3
• Palbociclib
• polycomb complex

Molti agenti citotossici come Doxorubicina causano danno al doppio filamento di DNA (DSB) che costituisce il danno cellulare più tossico ed è associato alla fosforilazione di H2AX, indicatore precoce dei DSB in vitro e in vivo. Abbiamo analizzato queste lesioni con un’ immunofluorescenza in cui il numero di foci verdi γH2AX era maggiore nelle cellule THP1 trattate con Doxo / GSK126 rispetto al campione trattato con Doxo. Il test della cometa ha confermato questi risultati indicando una maggiore percentuale di danni al DNA in cellule trattate con Doxo / GSK126, mentre il dosaggio citofluorimetrico ha dimostrato una percentuale più elevata di cellule apoptotiche dopo i trattamenti di inibizione EZH2 e doxorubicina. Questi risultati confermano come la de-condensazione della cromatina nelle cellule THP1 inibendo EZH2 con GSK126 seguita dal trattamento con Doxorubicina aumenta la suscettibilità agli agenti citotossici. La conoscenza di questa struttura specifica della cromatina post-replicativa ha offerto la possibilità di combinare agenti corrosivi del DNA attualmente utilizzati e inibitori dell'enzima EZH2 e migliorare gli effetti genotossici. Questo approccio può consentire ai pazienti affetti da AML di essere trattati con dosi ridotte di questi farmaci, limitando eventualmente i loro effetti collaterali.

Many cytotoxic agents such as Doxorubicin cause DSB DNA that make up the most toxic cell damage and is associated with the phosphorylation of H2AX, early indicator of DSBs in vitro and in vivo. We analyzed these lesions with an IF in which the number of green foci γH2AX was higher in THP1 cells treated with Doxo / GSK126 compared to the sample treated with Doxo. The comet assay confirmed these results by indicating a higher percentage of DNA damage in cells treated with Doxo / GSK126, while the cytofluorimetric assay demonstrated a higher percentage of apoptotic cells after EZH2 and doxorubicin inhibition treatments. These results confirm that the de-condensation of chromatin in THP1 cells by inhibiting EZH2 with GSK126 followed by treatment with Doxorubicin increases the susceptibility to cytotoxic agents.Knowledge of this specific structure of post-replicative chromatin offered the possibility for combining currently used DNA damaging agents and EZH2 enzyme inhibitors and enhance the genotoxic effects. This approach may allow elderly AML patients to be treated with reduced doses of these drugs possibly limiting their side effects.