Riassunto analitico
Nei mammiferi la famiglia delle piccole proteine da shock termico (HSPBs) è composta da dieci membri (HSPB1-HSPB10) e tra questi, HSPB2 e HSPB3 sono quelli che hanno ricevuto meno attenzione dalla comunità scientifica e le loro funzioni sono in gran parte sconosciute. La lista di mutazioni nel gene HSPB3 associate a neuropatie periferiche e miopatie congenite è rapidamente cresciuta negli ultimi anni. Ad oggi conosciamo la mutazione missenso R7S e la Y118H (associate a neuropatia motoria distale di tipo 2C) e le mutazioni R116P e A33AfsX50 (identificate in soggetti con miopatie). Queste scoperte evidenziano che HSPB3 (o il complesso che forma con HSPB2) eserciterebbe importanti funzioni per la vitalità e funzionalità del motoneurone e delle cellule muscolari. Questo lavoro di tesi ha avuto lo scopo di sviluppare particelle lentivirali per la produzione di HSPB3 con tag-myc, nonchè per il silenziamento genico di HSPB3 endogena in mioblasti differenzianti. Utilizzando questi vettori per la downregolazione e la sovraespressione di HSPB3 abbiamo effettuato studi di base per determinarne la localizzazione subcellulare nelle cellule umane, in particolare nei mioblasti. Abbiamo inoltre valutato l'impatto del silenziamento della proteina HSPB3 sul processo di differenziamento muscolare e su uno dei suoi principali protagonisti, il fattore di trascrizione muscolare miogenina.
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